CARACTERIZACIÓN CEPAS DE Trichoderma AISLADAS DE SUELOS DE JUJUY-ARGENTINA

Resumen

La compleja taxonomía del género Trichoderma plantea la utilización de técnicas complementarias, basadas en caracteres morfológicos de especie, moleculares y de compatibilidad vegetativa. Son objetivos del presente trabajo caracterizar tres cepas de Trichoderma: T1, T15 aisladas de muestras de suelo de la Depto. Yavi y T16 del Dpto. Tumbaya, provincia de Jujuy. Se realizaron tres repeticiones/caja de cada cepa, en Agar Papa Glucosado (APG 2%) y Agar Spezieller Nahrstoffarmer (SNA) para la caracterización y determinación del radio de colonia; a partir de cultivos de 96 h en SNA se realizó montajes en KOH 3% y observación microscópica para la descripción micromorfológica. La caracterización molecular implicó la extracción del ADN utilizando el kit Easy PureR Genomic DNA Kit (EE 101), amplificación por PCR de la región ITS1-5,8S-ITS2 del ADN ribosómico; los productos fueron secuenciados utilizando el servicio de Macrogen Korea. Se utilizó el programa Geneious 9.1.5 para el análisis, contrastando las secuencias con la base de datos moleculares del National Center for Biotechnology Information-NCBI mediante TrichoBLAST. Se utilizó TNT y MEGAS 6 para análisis filogenético. La evaluación de combatividad vegetativa entre las cepas incluyó una cepa de referencia T72 caracterizada como Trichoderma harzianum. Se realizaron tres réplicas en PDA 2% de cada combinación de cepas enfrentadas, las que se incubaron a 28°C durante 72 h, la compatibilidad se determinó mediante indicadores de compatibilidad/ incompatibilidad. La caracterización morfológica determinó que las tres cepas pertenecen al clado Viridie especie Trichoderma asperellum, lo cual guarda correspondencia con la caracterización molecular donde: T1 Trichoderma asperelloides/T. asperellum y T15 y T16 Trichoderma asperelloides. Las tres cepas evidenciaron compatibilidad vegetativa, resultando incompatibles con la cepa de referencia. Las técnicas aplicadas permitieron caracterizar las cepas, aspecto relevante para avanzar en el desarrollo de productos biotecnológicos de uso agrícola.